麻痹性貝類毒素酶聯(lián)試劑盒試劑盒基于競爭性ELISA酶聯(lián)免疫的方法，麻痹性貝類毒素的抗體包被于酶標孔內，樣品與麻痹性貝類毒素-酶標記物加入到微孔內，若樣品中有麻痹性貝類毒素殘留，它將與貝類毒素-酶標記物共同競爭酶標板包被的抗體。加入TMB底物后，顏色發(fā)生變化，經酶標儀檢測讀數(shù)后確定樣品中貝類毒素的含量。顏色的深淺與毒素的殘留量成反比

警告

實驗前請閱讀以下文字，以保證獲得實驗效果。

ü 標準品中含有腹瀉性貝類毒素，請小心使用。

ü 不要使用過期的試劑盒。

ü 不同批次的試劑盒不要混用，抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。

ü 盡量保持室溫（25±2.5）℃，避免在通風口操作防止溫度過低，過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的，不要在陽光直射下實驗，防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間，如果工作臺溫度過低，應該鋪墊若干紙巾或者其他物料。

ü 加入樣品或者試劑到空的微孔板時，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接觸。

ü 孵育時間的計算越規(guī)范越好，保持添加標準品的一致性，先添加標準品后添加樣品。

ü 從低濃度到高濃度地添加標準品，降低影響標準品曲線質量的風險。

ü 將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中，冷藏保存。

酶聯(lián)免疫反應測試步驟

以下為計算份量的表格，用戶可根據自己的需要來確定需要配置多少試劑。

1) 加入50mL標準品或樣品在所設定的孔中；

2) 每孔加入50mL 貝類毒素酶標物后，輕輕混勻20秒；

3) 室溫（25±2.5）℃下避光孵育40分鐘；

4) 每次加入1×洗液250mL，洗板3次，最后一次洗板后，倒置酶標板于干燥紙巾上清除多余水分；

5) 加入100mL TMB底物，輕輕晃動20秒以便搖勻，避光條件下室溫（25±2.5）℃孵育12分鐘；

6) 加入50mL終止液終止反應；

7) 酶標儀450nm讀數(shù)。

4．結果計算

(1) 用平均相對吸光值建立標準曲線（以相對吸光值為縱坐標，濃度為橫坐標）

相對吸光度值 (%) = (標準或樣品吸光度值/零標準吸光度值) ´ 100

(2) 0標準品點OD在1.2-1.5之間，IC 50 在0.6-1.5ng/ml 采用四參數(shù)擬合曲線進行含量的統(tǒng)計